在細胞培養(yǎng)領(lǐng)域,培養(yǎng)基的選擇對于細胞的生長、增殖和分化至關(guān)重要。DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)和DMEM/F12是兩種常用的培養(yǎng)基,它們在成分、用途以及適用的細胞類型上存在一定的差異。
DMEM培養(yǎng)基
DMEM培養(yǎng)基是在經(jīng)典的MEM(最小必需培養(yǎng)基)基礎(chǔ)上改良而成,由Eagle于1959年開發(fā),后來由Dulbecco進行了改進。與MEM相比,DMEM增加了2倍的氨基酸和4倍的維生素含量,還加入了非必須氨基酸、微量鐵離子和丙酮酸鈉。這些改進使得DMEM成為支持多種哺乳動物細胞生長與繁殖的理想選擇。
根據(jù)葡萄糖含量的不同,DMEM可分為低糖型(1000 mg/L葡萄糖)和高糖型(4500 mg/L葡萄糖)。低糖型培養(yǎng)基更適合代謝速度較慢且依賴貼壁生長的細胞,如原代細胞和某些癌細胞。高糖型培養(yǎng)基則由于其提供更多的能量,更適合于生長速度快、粘附性低的細胞類型,如雜交瘤骨髓瘤細胞、克隆細胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細胞。此外,還有不含葡萄糖的DMEM,這種培養(yǎng)基可以根據(jù)具體研究需求自行調(diào)節(jié)葡萄糖濃度,提供了更大的實驗靈活性。
DMEM因其成分的優(yōu)化設(shè)計,廣泛應(yīng)用于多種細胞培養(yǎng)領(lǐng)域。例如,在疫苗生產(chǎn)中,DMEM被用于CHO細胞表達EPO(促紅細胞生成素)和乙型肝炎疫苗的生產(chǎn)中。其高糖型培養(yǎng)基常用于生長快的單一細胞培養(yǎng)和病毒宿主細胞的培養(yǎng),而低糖型則更適合代謝作用較慢的細胞培養(yǎng)。
DMEM/F12培養(yǎng)基
DMEM/F12培養(yǎng)基是通過將DMEM和Ham's F-12 Nutrient Mixture以1:1的比例混合得到的。Ham's F-12培養(yǎng)基由Ham于1965年開發(fā),含有與DMEM類似的營養(yǎng)物質(zhì),但其配方略有不同。這種混合基質(zhì)結(jié)合了兩種培養(yǎng)基的優(yōu)點,提供了更全面的營養(yǎng)物質(zhì),以支持多種細胞系的生長和增殖。
DMEM/F12培養(yǎng)基的主要成分包括糖類、氨基酸、維生素、礦物質(zhì)、脂質(zhì)以及pH緩沖劑等。這些成分共同為細胞提供能量、碳源、蛋白質(zhì)合成所需的氨基酸、細胞代謝所需的維生素和礦物質(zhì)等。此外,DMEM/F12還含有緩沖劑(如碳酸氫鈉、HEPES),用于調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH值,維持細胞培養(yǎng)的穩(wěn)定性。
DMEM/F12培養(yǎng)基因其廣泛的適用性,常用于多種細胞系的培養(yǎng),包括腫瘤細胞、原代細胞、懸浮細胞和貼壁細胞等。例如,它適用于293細胞系(一種常用的人類胚胎腎細胞系)、HeLa細胞系(一種源于人宮頸癌的細胞系)、MCF-7細胞系(一種人類乳腺癌細胞系)等多種細胞系的培養(yǎng)和繁殖。此外,DMEM/F12還適用于神經(jīng)元和心肌細胞等特定類型的細胞培養(yǎng)。
兩者之間的區(qū)別與選擇
雖然DMEM和DMEM/F12在基本功能和用途上相似,都為細胞提供必要的營養(yǎng)和生長因子,支持細胞的生長和增殖,但它們在成分和適用的細胞類型上存在一定的差異。
成分差異:DMEM主要含有氨基酸、維生素、無機鹽和葡萄糖等營養(yǎng)成分,而DMEM/F12則結(jié)合了DMEM和Ham's F-12的優(yōu)點,提供了更全面的營養(yǎng)物質(zhì)。
適用細胞類型:DMEM適用于多種哺乳動物細胞的培養(yǎng),特別是根據(jù)葡萄糖含量的不同,適用于不同代謝速度和生長特性的細胞。而DMEM/F12則因其全面的營養(yǎng)成分,更適用于多種細胞系的培養(yǎng),包括一些對營養(yǎng)成分要求較高的細胞類型。
在選擇使用哪種培養(yǎng)基時,通常需要根據(jù)具體的細胞類型和實驗要求來決定。對于某些特定的細胞系或?qū)嶒灄l件,可能需要進一步調(diào)整培養(yǎng)基的配方或添加額外的生長因子和激素等。
綜上所述,DMEM和DMEM/F12在細胞培養(yǎng)領(lǐng)域都具有廣泛的應(yīng)用價值,但它們在成分和適用的細胞類型上存在一定的差異。了解這些差異并根據(jù)具體的實驗需求選擇合適的培養(yǎng)基,對于成功培養(yǎng)細胞和研究細胞生物學(xué)過程十分重要。