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支原體污染檢測的國際標(biāo)準(zhǔn)化進(jìn)展,Venor®GeM支原體檢測助力研究

更新時(shí)間:2023-08-06  |  點(diǎn)擊率:418

核酸擴(kuò)增技術(shù)(Nucleic acid amplification technique,簡稱NAT)的應(yīng)用正在逐漸取代基于培養(yǎng)的方法,成為細(xì)胞培養(yǎng)中檢測支原體污染的新選擇。德國MB公司生產(chǎn)的Venor®GeM qEP 支原體檢測試劑盒就是應(yīng)用了NAT方法中的qPCR方法。

 

然而,不同的支原體NAT檢測方法之間,如檢測限和定量特性等,差異較大。為了協(xié)調(diào)支原體NAT檢測方法,生物參考材料的使用顯得尤為重要。為此,國際性可行性研究進(jìn)行了多方參與的努力,涉及21個(gè)實(shí)驗(yàn)室,采用26種定性、半定量或定量設(shè)計(jì)的NAT檢測方法,分析了四種遠(yuǎn)緣相關(guān)的支原體物種(包括Acholeplasma laidlawii,Mycoplasma fermentansM. orale,M. pneumoniae)的凍干制劑,并在不同濃度下進(jìn)行了測試。

 

在一項(xiàng)研究中,發(fā)現(xiàn)使用M. fermentans制劑作為通用參考材料,可以有效降低試劑間的變異。于是,在進(jìn)一步的可比性研究中,對(duì)該制劑進(jìn)行了再生產(chǎn)和詳細(xì)的表征,并確認(rèn)了其在不同NAT方法下的效價(jià),以NAT可檢測單位(IU/ml)來表示。經(jīng)過世界衛(wèi)生組織(WHO)生物標(biāo)準(zhǔn)化專家委員會(huì)(ECBS)的認(rèn)證,該制劑被正式確定為第一個(gè)世界衛(wèi)生組織國際標(biāo)準(zhǔn),用于基于核酸擴(kuò)增技術(shù)的通用支原體檢測"WHO Tech Rep Ser 987:42, 2014),其效價(jià)為200,000 IU/ml

 

相關(guān)研究發(fā)表在《Appl Environ Microbiol》上,文章標(biāo)題為:“World Health Organization International Standard To Harmonize Assays for Detection of Mycoplasma DNA"。

 

目前,這一世界衛(wèi)生組織國際標(biāo)準(zhǔn)已經(jīng)成為支原體NAT檢測方法的重要參考制劑。它不僅可用于評(píng)估NAT檢測方法的分析靈敏度,還可用于定量檢測方法的單位化校準(zhǔn),并對(duì)支原體檢測領(lǐng)域的監(jiān)管要求進(jìn)行規(guī)定。這標(biāo)志著支原體污染檢測在國際標(biāo)準(zhǔn)化方面取得了重要進(jìn)展,將為該領(lǐng)域的研究和應(yīng)用提供更加統(tǒng)一和可靠的基準(zhǔn),進(jìn)一步促進(jìn)細(xì)胞治療產(chǎn)品的安全和有效應(yīng)用。


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