第一次啪要猛j还是要温柔点,国产熟妇另类久久久久,欧美bbbwbbwbbwbbw,老师说我考好了就随便我怎样

當前位置:首頁  >  技術(shù)文章  >  支原體檢測試劑盒qPCR Kit (經(jīng)典法)的操作步驟

支原體檢測試劑盒qPCR Kit (經(jīng)典法)的操作步驟

更新時間:2022-11-23  |  點擊率:1016

支原體qPCR法介紹:

熒光定量PCR法(qPCR):是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上,將『針對支原體特異性保守序列的探針』做熒光標記,使PCR擴增后的產(chǎn)物帶有熒光,利用熒光信號的變化和配套軟件,進行DNA擴增反應(yīng)的實時監(jiān)測,簡稱qPCR。

優(yōu)點:

①靈敏度高、特異性強。

②時間短,2-3小時出結(jié)果

③檢測結(jié)果可定量

④操作簡便

缺點:

①對于已做支原體滅活處理的樣品,由于支原體DNA仍舊存在其中,PCR結(jié)果會出現(xiàn)假陽性。(可用培養(yǎng)法做補充驗證)

②不同廠家生產(chǎn)的試劑盒質(zhì)量差異巨大(由于引物及內(nèi)在設(shè)計不同),需謹慎選擇,盡量在專業(yè)人員推薦指導(dǎo)下使用。

操作步驟

第1步:樣本處理

a.細胞培養(yǎng)上清

b. 生物藥或需遵循藥典的樣本

說明:①樣品基質(zhì)可能會影響檢測的靈敏度。收集和篩選更高的樣品量可提高測定靈敏度。

②細胞培養(yǎng)物樣本含豐富的DNA酶,在低溫下也能降解支原DNA,影響檢測靈敏度。

建議:樣本做DNA抽提處理,實現(xiàn)最高靈敏度。

推薦:德國MB公司生產(chǎn)的專用支原體DNA提取試劑盒

Venor® Gem Sample Preparation Kit

該DNA抽提試劑盒已經(jīng)過廣泛驗證。

第2步:試劑制備

a.凍干粉溶解

b. 反應(yīng)體系制備

b1) 樣品為細胞上清篩查——反應(yīng)體系制備

b2) 樣品為生物藥——反應(yīng)體系制備

第3步:啟動熒光定量PCR儀

第4步:結(jié)果判別

FAM通道:檢測支原體熒光信號。HEX通道:檢測內(nèi)控對照熒光信號。

支原體DNA和內(nèi)控DNA存在信號的競爭性抑制。

支原體DNA越多,F(xiàn)AM通道信號越高,檢測內(nèi)控對照的HEX通道信號越低。

定量需基于Ct值和DNA標準曲線。

Ct<40為陽性結(jié)果。Ct≥40為陰性結(jié)果


ass大胆孕妇分娩pics| 欧美熟妇浓毛大bbw| 娇妻借朋友高h繁交h| 欧美zc0o人与善交另类a片| 欧美97色伦欧美一区二区日韩| 男宠用下面叫醒公主h| 欧美最猛黑人xxxx黑人猛交文| 成熟女人毛片www免费版在线| 紫黑硕大撕裂高h| 清区二三区国产好的精华液| 一女侍七夫巨h双修| 多p混交群体交乱嗯啊小说| 又硬又粗进去爽a片免费 | 色偷偷888欧美精品久久久| 粉嫩被黑人两根粗大猛烈进出视频| 一炕四女被窝交换啪啪| 蜜臀av在线播放一区二区三区| 情人在线观看| 国模冰莲自慰肥美胞极品人体图| 2012中文字幕| 久久久久无码精品国产| 国产成人盗摄精品a片在线观看| 美女扒开大腿让男人桶| 亚洲gv猛男gv无码男同短文| 日本熟妇乱妇熟色a片蜜桃| bdsm变态狂极端妓女| 伸进同桌奶罩里摸她胸作文| 国产精品黄黄久久久免费看| 豪妇荡乳1一5全集| 精品人伦一区二区三区蜜桃小说| 私人情侣网络站| 久久久久亚洲av成人无码电影| 精品国产乱码久久久久久人妻| 亚洲国产精品无码久久一区二区| h女主从小被c到大1v1| 国产av在线| 色欲色香天天天综合vvv| 被灌满精子的五个女校花| 黑人巨大精品欧美黑寡妇av免费 | 亚洲综合色一区二区三区| 久久久久夜色精品国产明星|